一、實驗室平台介紹

　　本實驗研究平台建立在北京市中(zhōng)醫(yī)研究所與首都醫(yī)科(kē)大學(xué)附屬北京中(zhōng)醫(yī)醫(yī)院中(zhōng)醫(yī)皮外科(kē)兩方面優勢的基礎之上。中(zhōng)醫(yī)院皮膚科(kē)是國(guó)家中(zhōng)醫(yī)藥管理(lǐ)局中(zhōng)醫(yī)皮膚科(kē)重點學(xué)科(kē)、重點專科(kē)建設單位，在國(guó)内有(yǒu)重要的學(xué)術地位;外科(kē)是北京市中(zhōng)醫(yī)管理(lǐ)局重點學(xué)科(kē)建設單位。前身是北京市中(zhōng)醫(yī)研究所病理(lǐ)生理(lǐ)研究室、生化研究室和藥理(lǐ)研究室，2003年得到北京市中(zhōng)醫(yī)管理(lǐ)局360萬的資助用(yòng)于“中(zhōng)醫(yī)外科(kē)三級實驗室”的建設，2006年建立了北京市科(kē)委“中(zhōng)醫(yī)皮外科(kē)外用(yòng)藥研究平台”， 2008年和2009年分(fēn)别通過國(guó)家中(zhōng)醫(yī)藥管理(lǐ)局“細胞病理(lǐ)三級實驗室”和“瘡瘍生肌理(lǐ)論及應用(yòng)重點實驗室”認證，正式更名(míng)并以此為(wèi)基礎繼續進行建設。

　　本實驗平台在細胞學(xué)、組織學(xué)和分(fēn)子生物(wù)學(xué)等方面有(yǒu)較好的研究條件和技(jì )術特長(cháng)。總面積約1000M2，擁有(yǒu)上千萬元設備。具(jù)有(yǒu)細胞培養室(設備有(yǒu)CO2孵箱、倒置顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡、熒光倒置顯微鏡、全自動酶标儀、熒光酶标儀、流式細胞儀等);分(fēn)子生物(wù)學(xué)實驗室(電(diàn)泳儀、微型印迹電(diàn)泳轉移系統、PCR儀、熒光定量PCR儀、紫外分(fēn)光光度計、凝膠電(diàn)泳成像系統、高速冷凍離心機、超低溫冰箱);形态學(xué)實驗室(包括脫水機、包埋機、石蠟切片機、冰凍切片機、圖像分(fēn)析系統等設備);儀器設施配套，運行狀态良好。北京市中(zhōng)醫(yī)研究所具(jù)有(yǒu)三級動物(wù)實驗室。

　　二、實驗室特色技(jì )術

　　1、 中(zhōng)醫(yī)藥對慢性皮膚潰瘍作(zuò)用(yòng)的機制研究

　　通過建立符合中(zhōng)醫(yī)特點的動物(wù)模型、細胞模型研究外用(yòng)中(zhōng)藥的作(zuò)用(yòng)環節;針對創面修複障礙的病理(lǐ)環節如修複細胞增殖緩慢及創面的高酶活性開展多(duō)方面的研究。

　　建立了多(duō)種皮膚潰瘍愈合遲緩性創面模型：阿黴素靜脈攻擊後大鼠全厚皮膚切除模型、表阿黴素皮間注射緻小(xiǎo)鼠皮膚潰瘍愈合遲緩性模型、小(xiǎo)鼠地塞米松攻擊後複合皮膚損傷的免疫抑制愈合遲緩性模型、老年大鼠全厚皮皮膚切除模型及STZ誘導糖尿病小(xiǎo)鼠全厚皮皮膚切除傷口模型、DBDB糖尿病傷口愈合遲緩性小(xiǎo)鼠 模型。建立體(tǐ)外模拟創面的細胞培養技(jì )術：低氧、低血清、低糖條件下成纖維細胞的培養、建立成纖維細胞氧化損傷模型、細胞體(tǐ)外傷口模型。角朊細胞、臍靜脈内皮細胞、人正常與慢性皮膚潰瘍成纖維細胞的培養及大鼠正常與慢性皮膚潰瘍成纖維細胞的原代培養。開展體(tǐ)外中(zhōng)藥成分(fēn)對創面酶活性分(fēn)析：采用(yòng)明膠酶譜法(MMP-1、2)、熒光明膠酶動力法、MMP-12活性測定法等，并開展WESTERN BLOT、酶免技(jì )術、放免技(jì )術、凝膠成像分(fēn)析技(jì )術等。

　　2、 中(zhōng)醫(yī)藥對皮膚炎症性疾病作(zuò)用(yòng)的機制研究

　　主要針對銀屑病、皮炎濕疹的炎症病理(lǐ)環節開展中(zhōng)藥的體(tǐ)内外的實驗研究。

　　通過大鼠角叉菜膠性足腫脹模型、二甲苯緻小(xiǎo)鼠耳腫脹模型、大鼠棉球肉芽腫模型、DNFB引發小(xiǎo)鼠遲發超敏反應模型、體(tǐ)外抗菌試驗(金黃色葡萄球菌、大腸杆菌、白色念珠菌乙型溶血性鏈球菌、綠膿杆菌、痤瘡丙酸杆菌等)，建立了外用(yòng)中(zhōng)藥對急慢性皮膚炎症的觀察體(tǐ)系。建立細胞炎症攻擊模型，開展中(zhōng)藥成分(fēn)對炎症因子攻擊後細胞黏附分(fēn)子受體(tǐ)表達、基質(zhì)蛋白酶分(fēn)泌等研究。

　　通過小(xiǎo)鼠陰道上皮有(yǒu)絲分(fēn)裂模型、鼠尾鱗片角化不全模型、普萘洛爾緻豚鼠耳部角化不全模型等經典的銀屑病動物(wù)模型，咪喹莫特表皮塗抹、咪喹莫特皮下注射、IL-23皮下注射、K5.START3C銀屑病樣轉基因小(xiǎo)鼠、K14/VEGF銀屑病樣轉基因小(xiǎo)鼠等新(xīn)興銀屑病動物(wù)模型，以及人外周血單核細胞來源的DC誘導培養、小(xiǎo)鼠脾髒T淋巴細胞誘導培養的Th17細胞、PMA活化的T淋巴細胞、IL17/TNFα/活化T細胞誘導的角質(zhì)細胞增殖、PMA/bFGF活化人真皮微血管内皮細胞等細胞模型，建立了系統的中(zhōng)藥複方、提取物(wù)及單體(tǐ)對銀屑病作(zuò)用(yòng)機制的觀察體(tǐ)系。對銀屑病動物(wù)模型皮損PASI評分(fēn)、HE染色，細胞增殖、活化、分(fēn)泌細胞因子及相關信号轉導通路等進行研究。

　　3、 中(zhōng)醫(yī)藥對皮膚色素代謝(xiè)障礙性疾病的作(zuò)用(yòng)機制研究

　　針對白癜風、黃褐斑等皮膚色素代謝(xiè)障礙性疾病，通過體(tǐ)外黑素細胞培養模型，研究中(zhōng)藥的作(zuò)用(yòng)環節。

　　建立黑素細胞氧化應激損傷模型，采用(yòng)WESTERN BLOT、RT—PCR、放免等技(jì )術開展中(zhōng)藥對黑素細胞活性、黑素含量、酪氨酸酶活性、酪氨酸酶合成信号轉導通路(CAMP-PKA通路)、TYR-mRNA、TRP-1,2 mRNA等研究。

　　4. 中(zhōng)醫(yī)藥對動脈粥樣硬化易損斑塊的作(zuò)用(yòng)機制研究

　　以ApoE基因敲除小(xiǎo)鼠為(wèi)研究對象，通過長(cháng)期高脂飼料喂養，建立小(xiǎo)鼠動脈粥樣硬化易損斑塊，通過中(zhōng)藥幹預研究，并基于表觀基因組學(xué)的分(fēn)析結果，同時結合HE染色、Massion染色、天狼星紅染色、Movat五色套染等病理(lǐ)學(xué)及WESTERN BLOT、RT—PCR、原位雜交、免疫組化等分(fēn)子生物(wù)學(xué)實驗技(jì )術，深入研究中(zhōng)藥對As易損斑塊的幹預環節及其表觀遺傳學(xué)機制。

　　5. 與動脈粥樣硬化易損斑塊相關的藥物(wù)作(zuò)用(yòng)靶點的篩選

　　以ApoE基因敲除小(xiǎo)鼠為(wèi)研究對象，通過長(cháng)期高脂飼料喂養，建立小(xiǎo)鼠動脈粥樣硬化易損斑塊和穩定斑塊模型，通過DNA甲基化芯片及基因表達譜芯片聯合篩選，結合生物(wù)信息學(xué)軟件的分(fēn)析結果，明确與動脈粥樣硬化易損斑塊相關的藥物(wù)作(zuò)用(yòng)靶點。對于篩選出的重要基因，通過western blot、免疫組化或熒光等實驗技(jì )術隊As相關組織表達譜進行檢測和細胞共定位實驗，并利用(yòng)轉基因小(xiǎo)鼠模型或細胞模型轉染幹預，深入研究基因的功能(néng)。

　　三、實驗室學(xué)術方向

　　本實驗平台基于首都醫(yī)科(kē)大學(xué)附屬北京中(zhōng)醫(yī)醫(yī)院中(zhōng)醫(yī)皮外科(kē)和心血管科(kē)的傳統優勢、臨床特色和雄厚的基礎研究背景，圍繞皮外科(kē)的重大、疑難、常見疾病(銀屑病、慢性皮膚潰瘍、動脈粥樣硬化濕疹皮炎、色素代謝(xiè)障礙性疾病)開展中(zhōng)醫(yī)藥治療皮外科(kē)疾病的臨床基礎研究。

　　實驗室主要研究方向：1.銀屑病的證候基礎及中(zhōng)醫(yī)藥的作(zuò)用(yòng)機制研究;

　　2.中(zhōng)醫(yī)藥治療白癜風的機制研究;

　　3.中(zhōng)醫(yī)藥治療濕疹、皮炎的機制研究;

　　4.中(zhōng)醫(yī)藥對慢性皮膚潰瘍的作(zuò)用(yòng)機制;

　　5.皮外科(kē)外用(yòng)藥的藥效學(xué)研究;

　　6. 中(zhōng)醫(yī)藥對動脈粥樣硬化的藥效學(xué)研究;

　　7. 動脈粥樣硬化的瘀毒病機及中(zhōng)醫(yī)藥的作(zuò)用(yòng)機制研究;

　　8. 與動脈粥樣硬化易損斑塊相關的藥物(wù)作(zuò)用(yòng)靶标的篩選

　　四、實驗室成果

　　實驗平台通過臨床基礎密切合作(zuò)，在近五年的建設中(zhōng)，聯合承擔科(kē)技(jì )部十一五支撐計劃2項、北京市科(kē)委項目2項、國(guó)家自然基金6項、北京市自然基金課題6項及其他(tā)各類課題12項。獲得北京市科(kē)學(xué)技(jì )術進步獎三等獎3項，中(zhōng)華中(zhōng)醫(yī)藥學(xué)會科(kē)技(jì )進步三等獎1項，國(guó)家中(zhōng)醫(yī)管理(lǐ)局基礎類科(kē)技(jì )進步三等獎1項，全國(guó)醫(yī)藥衛生科(kē)學(xué)大會獎2項，國(guó)家中(zhōng)醫(yī)局基礎研究三等獎1項。

　　承擔課題：

　　1.桂皮醛調節人慢性皮膚潰瘍成纖維細胞增殖信号傳導的分(fēn)子機制研究

　　(國(guó)家自然基金項目，編号：30472258，負責人：李 萍，經費：17萬，2005-2007)

　　2.滋補肝腎方調節黑素細胞酪氨酸酶表達及其信号轉導的分(fēn)子機理(lǐ)研究

　　(國(guó)家自然基金項目，編号：30572396，負責人：王莒生，經費：8.0萬，2006-2006)

　　3.基于熱毒入血傷絡理(lǐ)論研究銀屑病血熱證T細胞活化及涼血解毒中(zhōng)藥的幹預作(zuò)用(yòng)

　　(國(guó)家自然基金項目，編号：C03050302，負責人：李萍，經費：29.0萬，2007-2010)

　　4.滋補肝腎方調節黑素細胞酪氨酸酶表達及其信号轉導的分(fēn)子機理(lǐ)研究

　　(北京市自然基金項目，編号：7062011，負責人：王莒生，經費：13.0萬，2006-2008，)

　　5.外用(yòng)活血與化腐中(zhōng)藥對慢性皮膚潰瘍創面高酶活性的調節

　　(北京市自然基金項目，編号：7072014，負責人：李萍，經費：13.0萬， 2007-2009)

　　6.基于方證相應的動脈粥樣硬化痰瘀證候的代謝(xiè)組學(xué)分(fēn)析

　　(北京市自然基金項目，編号：7072013，負責人：劉衛紅，經費：13.0萬， 2007-2009)

　　7.回陽生肌法對慢性皮膚潰瘍膠原代謝(xiè)酶平衡的分(fēn)子調控

　　(北京市自然基金項目，編号：7052022，負責人：盛 巡，經費：10萬，2005-2006，)

　　8.柿葉對人黑素細胞黑素代謝(xiè)的影響及物(wù)質(zhì)基礎研究

　　(北京市自然基金項目，編号：7043066，負責人：曾祖平，經費：6萬，2004-2006，)

　　9.‘舌為(wèi)胃之鏡’理(lǐ)論的研究

　　(北京市自然基金項目，編号：7032014，負責人：李 萍，經費：10萬，2003-2005)

　　10.銀屑病證候要素組成規律與中(zhōng)醫(yī)方藥治療的規範化系統研究

　　(北京市科(kē)技(jì )計劃項目，編号：Y0905002040191，負責人：王莒生，經費：120.0萬，2005-2008)

　　11.銀屑病、中(zhōng)風中(zhōng)醫(yī)臨床療效提升系統研究

　　(北京科(kē)技(jì )計劃重大項目，編号：D09050703550000，課題編号：D08050703550901負責人：王萍、李萍，經費：500.0萬，2009-2012)

　　12.化腐生肌法調節慢性皮膚潰瘍創面高酶活性的研究

　　(國(guó)家中(zhōng)醫(yī)藥管理(lǐ)局青年基金項目，編号：06-07JQ01，負責人：趙京霞，經費：4.0萬， 2007-2008)

　　13.IL23/IL17軸在銀屑病發病機制中(zhōng)的作(zuò)用(yòng)及涼血解毒中(zhōng)藥的幹預研究

　　(北京市中(zhōng)醫(yī)藥科(kē)技(jì )計劃項目，編号：JJ2009-15，負責人：李萍，經費：20.0萬，2010-2012)

　　14.基于“冬病夏治”理(lǐ)論的貼敷法防治小(xiǎo)兒反複呼吸道感染的療效評價

　　(北京市中(zhōng)醫(yī)藥科(kē)技(jì )計劃項目，負責人：李萍，經費：5.0萬，2007-2009)

　　15.參元丹對不穩定性心絞痛患者循環内皮祖細胞的幹預作(zuò)用(yòng)

　　(北京市中(zhōng)醫(yī)藥科(kē)技(jì )計劃項目，負責人：劉衛紅，經費：5.0萬，2007-2009)

　　16.外用(yòng)回陽生肌中(zhōng)藥啓動慢性皮膚潰瘍愈合的分(fēn)子機制

　　(北京市中(zhōng)醫(yī)藥科(kē)技(jì )計劃項目，負責人：李萍，經費：16萬，2002-2004)

　　17.回陽生肌膏對慢性皮膚潰瘍成纖維細胞增殖和凋亡的調節作(zuò)用(yòng)的研究

　　(北京市中(zhōng)醫(yī)藥科(kē)技(jì )計劃項目，負責人：王芳，經費：7.0萬，2004-2006)

　　18.從溶酶體(tǐ)組織蛋白酶—細胞凋亡通路的影響探讨黃芪多(duō)糖對皮膚潰瘍愈合的作(zuò)用(yòng)

　　(北京市中(zhōng)醫(yī)管理(lǐ)局青年基金項目，編号：QN2007，負責人：張甘霖，經費：2.0萬，2008-2009)

　　19.涼血活血湯對尋常型銀屑病T淋巴細胞活化和增殖的作(zuò)用(yòng)

　　(北京市中(zhōng)醫(yī)管理(lǐ)局青年基金項目，編号：QN2007，負責人：趙京霞，經費：2.0萬， 2008-2009)

　　20.銀屑病血熱證“涼血解毒”治則的基礎研究

　　(北京市中(zhōng)醫(yī)管理(lǐ)局青年基金項目，編号：QN2008，負責人：劉欣，經費：2.0萬， 2009-2010)

　　21.參元丹膠囊對心肌細胞缺血模型自噬現象的幹預作(zuò)用(yòng)

　　(北京市中(zhōng)醫(yī)管理(lǐ)局青年基金項目，編号：QN2008，負責人：張蕾，經費：2.0萬， 2009-2010)

　　22.外用(yòng)中(zhōng)藥對慢性皮膚潰瘍愈合過程中(zhōng)細胞外基質(zhì)代謝(xiè)的影響

　　(國(guó)家人事部留學(xué)人員資助項目，負責人：李萍，經費：3.5萬，2003-2005)

　　23.益氣溫陽活血中(zhōng)藥對慢性創面成纖維細胞增殖調控的分(fēn)子機制研究

　　(北京市新(xīn)世紀百千萬人才培養專項項目，負責人：李 萍，經費：8萬)

　　24.外用(yòng)回陽生肌中(zhōng)藥啓動慢性皮膚潰瘍愈合的分(fēn)子機制

　　(北京市優秀人才培養專項經費資助項目，負責人：李 萍，經費：6萬，2003-2005)

　　五、實驗室團隊介紹

　　實驗平台現有(yǒu)研究人員14人，其中(zhōng)研究員1人，副研究員1人，博士8人，90%的人員為(wèi)碩士以上學(xué)曆，70%的人員為(wèi)35歲以下的青年骨幹。由博士生導師、副所長(cháng)李萍研究員擔任實驗平台主任。

　　李萍，女。研究員，博士生導師，病理(lǐ)生理(lǐ)室主任，副所長(cháng)。1998年獲得北京中(zhōng)醫(yī)藥大學(xué)中(zhōng)西醫(yī)結合醫(yī)學(xué)博士。1999-2001年法國(guó)國(guó)家醫(yī)學(xué)科(kē)學(xué)研究中(zhōng)心組織再生與修複研究室博士後研究。一直從事中(zhōng)西醫(yī)結合病理(lǐ)生理(lǐ)學(xué)的研究，主要研究方向為(wèi)炎症、組織損傷與修複，在核心期刊發表論文(wén)百餘篇。1994年入選北京市科(kē)技(jì )新(xīn)星;2004年入選跨世紀百千萬人才工(gōng)程市級人選。現任中(zhōng)國(guó)病理(lǐ)生理(lǐ)學(xué)會常務(wù)理(lǐ)事;中(zhōng)國(guó)病理(lǐ)生理(lǐ)學(xué)會中(zhōng)醫(yī)專業委員會主任委員;北京生理(lǐ)科(kē)學(xué)會第九屆理(lǐ)事會理(lǐ)事;北京中(zhōng)西醫(yī)結合學(xué)會副秘書長(cháng);北京中(zhōng)西醫(yī)結合學(xué)會第二屆青年委員會委員;北京腫瘤學(xué)會常委;北京藥理(lǐ)學(xué)會常務(wù)理(lǐ)事。曾獨立主持課題8項，其中(zhōng)國(guó)家級課題3項，省部級課題5項。獲得省部級成果4項。